期刊简介

本刊为中国医药生物技术协会会刊,是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物,国内外公开发行(CN 11-5512/R,ISSN 1673-713X)。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态,积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。

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  • 杂志名称:中国医药生物技术杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国医药生物技术协会
  • 国际刊号:1673-713X
  • 国内刊号:11-5512/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
中国医药生物技术杂志2018年第05期

一种高效制备人β2微球蛋白标准物质的方法和应用

邹丽辉;王萌;黄薇;张恩毅;肖飞;王玉梅

关键词:β2微球蛋白, 重组蛋白质类, 参考物质
摘要:目的 构建重组人 β2微球蛋白表达体系,高效快速获取 β2微球蛋白,为临床实验室检测参考物质的制备奠定基础.方法 优化人 β2微球蛋白序列,人工合成优化序列片段并与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至pRSF-Duet载体以构建重组人 β2微球蛋白表达质粒.使用大肠杆菌E.coli BL21(DE3)对重组质粒进行诱导表达,TEV蛋白酶切除MBP,全自动生化仪测定 β2微球蛋白浓度.对重组蛋白在4℃和 –20℃储存条件下的稳定性进行检测,对 β2微球蛋白纯品与校准品的互通性进行分析.结果 成功构建重组人 β2微球蛋白表达质粒,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)成功诱导重组蛋白表达,MBP-β2微球蛋白(MBP-β2-MG)浓度可达100 mg/L,β2微球蛋白浓度可达185 mg/L.在4℃和 –20℃储存条件下监测64周,β2微球蛋白稳定存在.β2微球蛋白纯品与RANDOX生化校准品互通性良好.结论 通过密码子优化,成功构建了重组 β2微球蛋白的高效表达系统,β2微球蛋白可溶性高,稳定性好,与国际通用校准品互通性好,可充分满足该产品诊断试剂制备的需求.