期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
荧光定量法测定DNA熔解温度
陈翔；张佳琦；汪泽；许旭；朱滨
关键词：
摘要：DNA熔解温度?指 DNA双链变性过程中一半双链解离为单链的温度[1],是 DNA片段的一个重要特性.准确测定 DNA片段 Tm值,是分子生物学实验方法(如 PCR检测技术、核酸杂交检测技术等)建立的基础,在疾病的分子诊断领域具有重要现实意义[2-4].影响 DNA片段 Tm值的因素有很多,如 DNA片段的长度、DNA片段的 GC%含量[5]、盐离子浓度、pH等[6].传统测定 DNA片段 Tm值的方法多用紫外分光光度法[7-9],该方法有一定的局限性,溶液需要量大,操作起来不方便.利用荧光试剂(如 SYBR Green I)与双链 DNA结合后荧光大大增强的特点,采用荧光定量法可以较好解决这些问题.用荧光定量法测定 DNA样品在含有 SYBR Green I溶液中的熔解曲线,根据其导数曲线熔解峰对应的温度可以确定 DNA样品的 Tm值.荧光定量 PCR仪溶液需求量小,不需太多操作,能很好地控制反应的温度,进行实时自动化检测[10-11].本文用荧光定量法测定不同大小、不同 GC%含量 DNA片段的 Tm值并研究了其影响因素,显示该法可用于实际样品测定.
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