期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
猴头菌原生质体制备及单核体鉴定研究
张琪；刘宏伟；陈娟；郭顺星
关键词：猴头菌, 原生质体, 单核体, 荧光染色
摘要：目的通过优化猴头菌原生质体的制备条件，结合荧光染色鉴定及分子鉴定获得高纯度的单核体，为进一步开展猴头菌基因组水平的研究提供材料。方法对三类酶系统、溶壁酶浓度、无机和有机两类稳渗剂、pH 3.5~6.5、酶解温度20~40℃、培养基成分以及菌龄为48~144 h 菌丝的原生质体制备条件进行考察。其中三类酶系统分别为：1.5%的单一酶系统（溶壁酶、纤维素酶、蜗牛酶），1.5%的纤维素酶和蜗牛酶的混合酶系统，2%的溶壁酶系统；溶壁酶浓度：1%、1.5%、2%、3%、4%；培养基成分的考察：碳源种类筛选及综合培养基中添加成分的筛选。将制得的原生质体稀释后涂板再生及鉴定，以选取单核菌丝。单核菌丝的鉴定方法包括：性状、显微及分子鉴定。其中显微鉴定的观察方法包括一般显微观察和 DAPI 荧光染色观察；分子鉴定扩增的是单核菌丝的核糖体内转录间隔区（ITS）序列。结果在马铃薯培养基中静置培养72 h 的猴头菌丝，用2%的溶壁酶液，以0.6 mol/L KCl 为渗透压稳定剂，在 pH 5.5、温度30℃的条件下酶解3 h，原生质体的释放量大；再生的单核体经形态及分子生物学鉴定证明是猴头菌。结论通过原生质体制备及再生方法获得的猴头菌的单核菌丝可以为猴头菌活性次生代谢产物相关基因的发掘奠定基础。
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