期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
利用四唑盐染料WST反映巨噬细胞受脂多糖刺激活化后的氧化应激和代谢变化
鞠瑞；陈玮；陈晨；郭磊；李娟；叶菜英；张德昌
关键词：脂多糖类, 氧化性应激, 能量代谢, 四唑盐染料
摘要：目的通过四唑盐染料显色方法分析巨噬细胞受脂多糖刺激后的氧化应激和代谢变化，分析这种方法在炎症研究中的应用价值。方法通过活细胞计数方法和 CCK-8检测试剂分别检测RAW264.7巨噬细胞的活力；用 CCK-8和 WST-1显色方法研究超氧阴离子的释放；用 DCFH-DA 荧光染色和流式细胞术检测细胞内活性氧的生成；用乳酸检测试剂盒和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 NAD+(H)检测试剂盒分别检测上清中乳酸和细胞内 NADH 的含量。结果经脂多糖刺激的 RAW264.7细胞的活细胞计数结果和 CCK-8显色结果存在反差；相同数目的正常培养细胞和脂多糖刺激细胞的 CCK-8显色比较，后者读数显著升高，超氧化物歧化酶能够下调 CCK-8显色读数，WST-1显色结果与 CCK-8一致，脂多糖刺激细胞中的活性氧含量显著增加；脂多糖导致 RAW264.7细胞上清中的乳酸含量和细胞内的 NADH 含量显著增加。结论应用 WST 染料测定经脂多糖刺激的 RAW264.7细胞活力时，测定结果会受到细胞中还原性物质——超氧阴离子和 NADH 含量变化的干扰。通过 WST-1或 WST-8显色实验，可验证脂多糖能够刺激 RAW264.7巨噬细胞发生氧化应激和能量代谢变化。这一显色实验在炎症研究和药物筛选中可能有重要应用价值。
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