期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
hDll1ext-Fc融合蛋白的表达纯化与初步鉴定
潘芸；高丽华；邵勇；王友亮；高招刚；段海峰；胡显文
关键词：配体, Notch, CHO 细胞, Delta-like, Fc融合蛋白
摘要：目的获得高效表达 hDll1ext-Fc 融合蛋白的细胞系以及具有生物学活性的目的蛋白。方法根据已知序列设计引物，并将 hDll1ext 基因片段经PCR 扩增，酶切后连接至 pIRES2-EGFP-Fc 中，挑选阳性克隆测序，将正确的重组质粒转染至 CHO-S 细胞，筛选高表达细胞系，利用 rProtein A 亲和柱纯化目的蛋白，并通过检测 Notch 下游信号分子 Hes1的表达及双荧光素酶报告基因实验检测蛋白活性。结果构建了 pIRES2-EGFP-hDll1ext-Fc 真核表达载体，并筛选了高效表达 hDll1ext-Fc 的 CHO-S 细胞系，纯化得到较高纯度的融合蛋白，配合生物活性检测实验显示，可溶性的 hDll1ext-Fc 能够激活 Hes1报告基因，并且能上调Notch 下游分子 Hes1的表达，证明其能够激活 Notch 信号通路。结论在 CHO-S 细胞中成功表达了 hDll1ext-Fc 融合蛋白，为进一步研究 Delta-like-1的生物学功能奠定重要基础。
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