期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
基于SM 蛋白的CHO细胞分泌工程化改造和抗体表达的研究
刘毅华；童梅；刘金毅；徐晨
关键词：CHO 细胞, 蛋白质工程, SLY1 蛋白质类, MUNC18c 蛋白质类, 贝伐单抗
摘要：目的：通过构建基于 SM 基因的分泌工程化改造的CHO-AV-SM 细胞株，探讨在悬浮培养条件下，过表达转运蛋白 SM 基因对分泌蛋白表达的影响。方法首先从人 HEK293FT 细胞中克隆出 sly1和munc18c 基因，然后构建含有 SM 基因的真核表达载体 pBSM；随后将 pBSM 质粒稳定转染入 CHO-AV 细胞并鉴定，获得了基于 SM 基因的分泌工程化改造的CHO-AV-SM 细胞株；在此基础上对 CHO-AV-SM 细胞株进行悬浮培养适应，并测定了 CHO-AV 和 CHO-AV-SM细胞株的生长和蛋白表达参数。结果过表达转运蛋白 SM 基因，CHO-AV-SM 细胞株的抗体表达量较 CHO-AV 抗体表达量提高约75%，且测得第6天细胞数达到大值，此时 CHO-AV 的表达量约为45.4μg/ml，CHO-AV-SM 的表达量为79.5μg/ml。结论通过构建全抗稳定表达细胞，在细胞中过表达 SM基因，并悬浮培养适应，建立了悬浮培养条件下基于转运蛋白过表达的分泌工程改造方法，为转运蛋白改造 CHO 细胞，提升全抗表达能力提供了有力支持。
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