期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
B7-H4实时荧光定量PCR检测方法的建立及其在人胃癌组织中的初步应用
王琦；蒋敬庭；魏文祥
关键词：胃肿瘤, 实时荧光定量PCR, B7-H4
摘要：目的 建立实时荧光定量PCR检测B7-H4的方法并初步应用于人胃癌组织.方法 将B7-H4和内参GAPDH的PCR扩增产物经测序鉴定正确后克隆入载体pMD19-T,构建重组质粒标准品,并纯化、定量及梯度稀释,分别建立B7-H4和GAPDH的标准曲线,应用实时荧光定量PCR检测8例人胃癌组织中的B7-H4相对于GAPDH的表达情况.结果 B7-H4的低检测拷贝数为5.27拷贝,线性范围5.27×101 ～ 5.27 × 107拷贝,标准曲线方程y =-3.1395 x+41.805,直线回归相关系数r=0.994 904,批间变异系数范围2.39％ ～ 3.59％,扩增效率108.2％; GAPDH的低检测拷贝数为38.6拷贝,线性范围3.86×102～ 3.86×107拷贝,标准曲线方程y=-3.2436x+ 41.083,直线回归相关系数r=0.998 913,批间变异系数范围2.26％～3.86％,扩增效率103.4％.8例人胃癌组织的B7-H4相对于GAPDHmRNA表达水平在0.044～0.888之间.结论 荧光定量PCR检测B7-H4的方法具备较高的敏感性和特异性,且系统有良好的重复性和线性范围.
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