期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
携带miR29c重组腺病毒的制备及其促骨髓瘤细胞凋亡作用
张怡堃；王华；杨萍；李泽良；杨月峰；陈协群；王立生
关键词：微RNAs, 细胞凋亡, 基因表达, 质粒, 腺病毒科, 骨髓瘤
摘要：目的 制备携带miR29c的重组腺病毒Ad5F 11 p-miR29c,评价miR29c对骨髓瘤细胞凋亡的影响.方法 巢式PCR扩增得到hsa-miR29c,将hsa-miR29c基因克隆到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,得到pShuttle-CMV-miR29c.鉴定正确后,PmeI线性化并转化含Ad5F11p骨架质粒的BJ5183感受态细胞,重组获得腺病毒载体.PacI线性化的重组腺病毒质粒转染HEK293细胞,制备重组腺病毒Ad5F11p-miR29c.以对照病毒Ad5F11p-EGFP感染人骨髓瘤细胞系SKO-007、U266和XG7,通过流式细胞术确定佳感染复数.Ad5F 11p-miR29c以佳感染复数感染骨髓瘤细胞,流式细胞术检测miR29c对细胞凋亡的影响.结果 PCR扩增获得miR29c基因,成功将其连接到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,经测序鉴定正确.采用Ad-easy系统,成功构建并制备了CMV启动的重组腺病毒Ad5F11p-miR29c.流式细胞术结果显示,Ad5F11p-EGFP对SKO-007和U266细胞的佳感染复数为150 MOI;而XG7为100 MOI.Ad5F11p-miR29c以佳感染复数感染细胞48 h后,细胞凋亡率升高.SKO-007细胞的凋亡率达到26.5％,XG7细胞的凋亡率达到46.9％.结论 成功制备重组腺病毒Ad5F11p-miR29c,并证实miR29c能够诱导骨髓瘤细胞凋亡.
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