期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
Ubc9基因重组腺病毒的构建及其在HeLa细胞中的表达
李薇；刘晓萍；徐祥；谭艳；于业军；李艳君；任书亭；贾跃伟
关键词：腺病毒科, Hela细胞, 基因表达, 质粒
摘要：目的 构建携带Ubc9基因的重组腺病毒质粒pAdEasy-1/Ubc9,制备含13bc9基因的重组腺病毒Ad-Ubc9,并使Ubc9在HeLa细胞中高效表达.方法 PCR法扩增目的 Ubc9基因:用pemⅠ酶切将穿梭质粒pAdTrack-CMV-Ubc9线性化;将线性化的穿梭质粒pAdTrack-CMV-Ubc9与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在感受态BJ5183菌内进行同源重组,筛选阳性重组子pAdEasy-1/Ubc9;再用PacⅠ酶切pAdEasy-1/Ubc9使之线性化,线性化的重组腺病毒质粒经脂质体转染HEK293细胞,进行重组腺病毒的包装和扩增.收集重组腺病毒,感染HeLa细胞,用Western blot方法检测Ubc9在HeLa细胞中的表达.结果 通过Pac Ⅰ酶切证实携带Uboc9基因的腺病毒载体构建成功,包装出携带Uboc9基因的腺病毒能有效感染HeLa细胞.结论 利用细菌内同源重组方法成功地构建了携带Ubc9的重组腺病毒载体,并能在HeLa细胞中高效表达.
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