期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊,是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物,国内外公开发行(CN 11-5512/R,ISSN 1673-713X)。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态,积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称:中国医药生物技术杂志
- 主管单位:中华人民共和国卫生部
- 主办单位:中国医药生物技术协会
- 国际刊号:1673-713X
- 国内刊号:11-5512/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
猪尿酸酶动力学特性研究
寇文娥;荣俊;于勤
关键词:尿酸氧化酶, 动力学, 猪
摘要:目的 研究作用温度、pH值、底物浓度对猪尿酸酶催化反应速度的影响,和猪尿酸酶的热稳定性、酸碱稳定性、保存的稳定性及Kin值.方法通过测定不同温度、pH值、不同底物浓度等反应条件下尿酸酶的活性来确定其适反应条件和酸碱稳定性.测定酶制剂在37℃和70℃保温不同时间后的残余活力,确定尿酸酶的热稳定性.测定酶制剂在4℃和加入不同比例的甘油后并在-20℃保存一定时间后的残留活力,确定尿酸酶保存的稳定性.用Lineweaver Burk法作图确定酶的Km值.结果在一定的条件下,该猪尿酸酶的适作用温度是37℃,适pH为8.4,而且pH在7.0以上活性保持稳定.热稳定性较好,在37℃处理48h时活性保持62.7%,在70℃处理1 h时活性仍保持17%.在适温度及pH条件下,底物浓度在0~30μmol/L酶活力上升明显,30-120 μmol/L 酶活力上升较缓慢,120~200μmol/L,酶活力无明显上升,故该猪尿酸酶达到大反应速度的底物浓度应在120 pmol/L.尿酸酶在4℃中保存2个月活性保持82.4%,加入20%甘油后在-20℃保存的稳定性好,2个月后活性仍保持92.8%.通过底物浓度与酶活力计算得到该酶催化尿酸的米氏常数(Km)为8.03μmo/L.结论该猪尿酸酶的理化性质较优越,适作用温度及反应佳pH接近人体生理条件,热稳定性和酸碱稳定性都较好,与底物的亲和力好,且易于保存,为该酶的临床应用提供了实验依据.
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