期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊，是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物，国内外公开发行（CN 11-5512/R，ISSN 1673-713X）。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态，积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称：中国医药生物技术杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会
- 国际刊号：1673-713X
- 国内刊号：11-5512/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
诱导干细胞分化的胰岛细胞形成胰岛样结构的实验研究
许世清；门秀丽；张文健；娄晋宁；蔡寒青
关键词：糖尿病, 胚胎干细胞, 细胞分化, 胰腺, 胰岛移植
摘要：目的 建立一种体外诱导干细胞分化的胰岛细胞形成胰岛样结构的技术方法.方法 体外诱导人胚胎胰腺干细胞分化为胰岛细胞,将胰岛细胞制备成浓度分别为1×10~4/ml、3×10~4/ml、1×10~5/ml、3×10~5/ml(1×10~4/ml、3×10~4/ml、1×10~5/ml、3×10~5/ml组)单细胞悬液,在含有细胞外基质(ECM)的培养基中悬浮培养24 h以诱导形成胰岛样结构,在荧光体视显微镜下观察胰岛样结构的形态和大小;采用免疫荧光染色方法检测胰岛样结构中.ECM成分及其细胞组成与定位.将胰岛样结构分别在含5.6和30.0 mmol/L葡萄糖的培养基中体外培养2 h,采用放射免疫法测定上清中胰岛素水平.建立糖尿病人鼠模型,经门静脉将胰岛样结构移植至大鼠肝脏,移植后连续3 d经鼠尾静脉检测血糖水平.结果 90%人胚胎胰腺干细胞分化的胰岛细胞形成了胰岛样结构,其包膜、大小均与天然人胰岛组织结构相似;以形成直径150μm大小胰岛样结构的比例为标准,比较各组细胞浓度与胰岛样结构形成率的关系,结果显示分别与1×104/ml、3×10~4/ml、3×10~5/ml组(25.0%±2.5%、28.0%±3.0%、21.5%±2.5%)相比,1×10~5/ml组胰岛样结构形成率佳(36.5%±4.0%,均P<0.01).胰岛样结构包膜上含有与天然人胰岛组织类似的ECM成分,且其中含有胰岛素、胰高血糖素和 C-肽阳性细胞,其细胞比例与分布均与天然人胰岛组织类似.30.0 mmol/L高糖浓度刺激后胰岛样结构胰岛素释放水平[(110±12)μIU/ml]较5.6 mmol/L基础糖浓度[(59.5±8.0)μIU/ml]明显增加(P<0.01),胰岛样结构移植后糖尿病大鼠血糖水平较移植前均明显降低(P<0.01).结论 本研究建立的技术方法可以将干细胞分化的胰岛细胞在体外大量、快速、高效地诱导形成具有功能的胰岛样结构.
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