期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊,是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物,国内外公开发行(CN 11-5512/R,ISSN 1673-713X)。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态,积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称:中国医药生物技术杂志
- 主管单位:中华人民共和国卫生部
- 主办单位:中国医药生物技术协会
- 国际刊号:1673-713X
- 国内刊号:11-5512/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
突变型Axin2对细胞增殖的影响及其机制的研究
王凤玮;温玲;朱思伟;王新卓;尹晓东;张超;王贺桐;刘万国
关键词:基因, 肿瘤抑制, 细胞系, 肿瘤, 突变, 细胞增殖
摘要:目的 Axin是新近发现的Wnt信号传导系统的抑痛基因,本文在体研究其羧基端缺失突变(mtAxin2)对细胞增殖的影响并探索其相关机制.方法 采用pCMV-Flag-mtAxin2质粒瞬时转染293细胞,并用G418筛选稳定表达mtAxin2的细胞株;使用Dual-Luciferase报告检测系统检测Firefly和Renilla荧光酶活性,采用Trpan Blue染色方法检测细胞增值活性,用流式细胞仪检测mtAxin2对细胞周期的影响,应用Western blot方法检测mtAxin2对Wnt信号传导系统下游皋因的影响,G0/1细胞间步化S期进入实验研究mtAxin2对细胞生长影响的机理.结果 经G418筛选后在293细胞中获得的细胞株,western blot检测可见明显的mtAxin2蛋白表达;Western blot和Dual-Luciferase报告检测系统显示在稳定表达mtAxin2的细胞株中β-catenin蛋白水平增加,TCF活性增高;通过Trypan Blue排除实验计数绘制细胞生长曲线,显示mtAxin2促进细胞的生长;流式细胞仪检测发现在稳定表达mtAxin2的细胞株中S期细胞的比例较高.Western blot结果显示在稳定表达mtAxin2的细胞株中β-catenin蛋白水平上升的同时,磷酸化的β-catenin蛋白水平却下降,下游基因产物CyclinD1和cdc2表达也增加;G0/G1期同步化细胞释放后12 h流式细胞仪检测发现稳定表达mtAxin2的细胞株巾S期细胞比例明显增加,为293细胞的2~3倍.结论 Wnt信号传导系统在细胞生长中起重要作用,mtAxin2通过cyclin D1促进了细胞的增殖,发挥癌基因的作用.
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