期刊简介
本刊为中国医药生物技术协会会刊,是面向全国医药生物技术研发、应用、产业化、市场管理的综合性学术刊物,国内外公开发行(CN 11-5512/R,ISSN 1673-713X)。办刊宗旨是及时全面地反映我国医药生物技术研发成果和行业动态,积极推进医药生物技术研发及产业化发展。主要栏目有述评、论著、法规与标准、研发/质量管理与控制、产业/企业家论坛、会议纪要、综述、讲座、继续教育园地、争鸣园地等。欢迎踊跃投稿和订阅。
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- 杂志名称:中国医药生物技术杂志
- 主管单位:中华人民共和国卫生部
- 主办单位:中国医药生物技术协会
- 国际刊号:1673-713X
- 国内刊号:11-5512/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
丁硫氨酸硫酸亚胺早期处理抑制单核细胞向树突状细胞的分化
冯永红;李莲
关键词:丁硫氨酸硫酸亚胺, 树突状细胞, 单核细胞, 谷胱甘肽, 细胞分化
摘要:目的 研究细胞氧化-还原态对树突状细胞(DC)分化和功能的影响.方法 细胞氧化-还原态的调控应用特异性谷胱甘肽(GSH)合成抑制剂丁硫氨酸硫酸亚胺(BSO).自健康人外周血单个核细胞(PBMC)分离单核细胞,在含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和IL-4的RPMI 1640培养液中诱导分化DC.将单核细胞分为BSO早期(培养第1天)用药组、BSO晚期(培养第5天)用药组和不予BSO处理的对照组.BSO用药剂量为终浓度1 mmol/L,换液时补加相应剂量的BSO.培养第5天,分别给予加入脂多糖(LPS)100 ng/ml(LPS刺激组)或重组人干扰素γ(rhIFN-γ)20 U/ml(IFN-γ刺激组)或不予刺激(无刺激组)的处理;培养第7天收集各组悬浮细胞进行表型分析和功能检测,并在倒置显微镜下观察BSO早期用药组和对照组贴壁细胞.表型分析采用特异性荧光标记单抗及流式细胞仪.功能检测采用混合淋巴细胞反应试验,将经丝裂霉素C处理的DC(刺激细胞)与异基因非贴壁PBMC(反应细胞)混合(刺激细胞:反应细胞分别为1:25、1:50、1:100)培养5 d后,用3H-胸腺嘧啶核苷法检测淋巴细胞增殖情况.结果 培养第7天,镜下观察显示:BSO早期用药组贴壁细胞明显多于对照组;流式细胞仪检测显示BSO早期用药组CD86和CD1a表达明显低于对照组,CD86平均荧光强度(MFI)分别为311.3±97.3、552.0±97.9(P=0.01),CD1a分别为52.2±22.2、121.2±4.2(P=0.03);BSO早期用药组及对照组3H-胸腺嘧啶核苷掺入量(cpm)在刺激细胞:反应细胞=1:25时分别为1587±1458和9336±1333(P=0.015);加入rhIFN-γ 20 U/ml刺激后二组CD86 MFI分别为495.9±143.9和800.4±27.7(P=0.06),而加入LPS 100 ng/ml刺激后二组CD86 MFI分别为1736.7±375.7和1960.8±494.5(P>0.05).表明单核细胞分化早期加入BSO对DC的分化和功能有抑制作用,并对IFN-γ诱导DC成熟有抑制作用.BSO晚期用药组DC抗原提呈功能分子的表达及与对照组比较均无明显差异,对LPS或rhIFN-γ刺激的DC成熟也无明显影响.结论 BSO早期持续处理能抑制单核细胞向DC细胞的分化,细胞内氧化-还原态水平可能是影响DC分化成熟的关键因子.
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